少年梁祝浙江余杭人氏梁山伯,自幼与寡母相依为命,适逢土地竞标大赛,梁母望其夺得标售权,筹得赴书院经费。山伯夺标后,却因心善而将标旗让出。梁母只有变卖玉替供山伯上书院。上虞县首富祝公远,其子祝威不求上进,被书院夫子逐回,妹妹英台聪灵敏慧,一心向学,为得父母首肯,英台用计称病,再改扮郎中来祝家看诊,公远夫妇竟未识破,因而答应英台女扮男装前去求学。英台、吟心与山伯、四九分别来到城内,见一对母女遭劫,山伯奋勇抓贼,夺回财物。偷儿聚众报复四人,忽有一侠士现身解救众人之后,飘然而去。山伯、英台惺惺相惜义结金兰,相借上尼山。途中,山伯无意撞见英台长发之女子模样,英台大惊。
山伯心生怀疑,英台假称曾立誓未得功名,永不断发,以此瞒过山伯。一行人来到书院,遇见当日之侠士,知其亦是来此求学之人,名叫路秉章,三人结为知交。书院夫子丁程雍,学识渊博,道貌岸然。行拜师礼时,山伯之束修被掉包成狗屎,程雍以为其存心戏弄,将其逐出书院。此时程雍之夫人与女儿丁香出面阻止,原来他们乃是当日之母女。程雍惧内,遂答应收留山伯,并让其以杂役弥补学费。一日,恶学生类敬文、辛平等人欺负同学李善敏,山伯、英台劝解反被委、辛制住,秉章及时出现教训二人。书院之澡堂定时提供热水予学生洗澡,山伯与秉章邀英台同去,英台抵死不从,仍硬被二人拖去,英台急欲逃走,却不慎跌入浴池中。众人哄笑中,英台仓皇逃离澡堂。是夜,英台与吟心摸黑至澡堂洗澡,被巡夜的山伯发现,英台再施巧计摆脱。一日,秉章教导众人打醉拳,遭委、辛讪笑,秉章指导英台打败类敬文,使其更加怀恨。
好动活泼的女孩祝英台,对外面的世界充满了好奇,于是女扮男装到私塾里去上学。第一天,英台遇到了她的新同学梁山伯,梁山伯是个俊秀斯文却又有正义感的好孩子,英台不由心生好感,两人成了好朋友。英台与山伯在学校里刻苦读书,下课后也经常一起结伴出游,每日朝夕相处形影不离,两人的感情越来越好,而英台对山伯的心意也越来越坚定。
时光飞逝,转眼三年过去了,两人都由少不更事的孩童成长为翩翩少年,英台的家里不断催促她返家,挂念家人的英台在临行前晚,对山伯表白了自己的身份与情感,两个人私下互许终身,然而这一切,都被躲在一旁的纨绔子弟马文才偷看到了……
回到家中的英台,发现自己已经被父母许配给马文才,英台如闻晴天霹雳,但是马文才之父——势高权重的马太守却硬是逼着祝家交出女儿,为了父亲与母亲,英台只能在内心默默祈祷山伯快快来访。
憨直的山伯提早结束学业,前往英台家中拜访。谁知道刚到祝家就惊悉英台已经许配给了马文才,他黯然憔悴离开祝家,心碎的山伯积郁成疾,终因不堪悲伤而死去。山伯死讯传来,英台痛不欲生,她打扮成美丽的新娘,偷偷离家,来到了山伯的墓前。就在此时,墓碑突然裂开,山伯温柔地微笑着向她伸出手,英台跟随爱人缓缓走入墓中,两人化身为翩翩彩蝶,双宿双飞,顺着两只蝴蝶飞舞的轨迹,花儿也满天开放,整个世界都成了彩色的天地……